常常有客戶(hù)拿到可提取物/浸出物報(bào)告第一時(shí)間都會(huì)問(wèn)：“可提取物和浸出物量的接受標(biāo)準(zhǔn)是多少?”，“我這個(gè)量到底在不在接受范圍內(nèi)?”然而,并非所有的測(cè)試都有絕對(duì)的接受標(biāo)準(zhǔn), 答案是“這需要進(jìn)行評(píng)估”。那么該如何評(píng)估呢？

面對(duì)各種紅外、液相圖譜，檢測(cè)出來(lái)的各種化合物，您是否會(huì)覺(jué)得無(wú)從下手？如果您看了下面的介紹，面對(duì)如何進(jìn)行可提取和浸出物安全性評(píng)估的問(wèn)題就不再會(huì)頭疼了。兩個(gè)對(duì)策，輕松搞定如何進(jìn)行評(píng)估的難題。

首先我們來(lái)回顧一下,可提取物和浸出物是什么?

由塑性和/或彈性材料制造的過(guò)濾器、容器和其他組件，廣泛用于制藥生產(chǎn)。當(dāng)這些組件與工藝中間體和最終藥品直接接觸時(shí)，會(huì)遷移一些化合物進(jìn)入到溶液中。

可提取物是指在苛刻條件下(例如溶劑, 溫度,時(shí)間)，不同物理化學(xué)性質(zhì)的溶劑可從塑性或彈性材料(例如過(guò)濾器,一次性使用系統(tǒng))中提取出的化合物；

浸出物是指在正常使用條件下，從塑性或彈性材料(例如過(guò)濾器,一次性使用系統(tǒng))中遷移而進(jìn)入實(shí)際藥品的化合物。

世界各地的GMP 指南都要求與藥品接觸的表面不應(yīng)具有反應(yīng)性、添加性或吸收性，以致藥品的安全性、強(qiáng)度、純度或質(zhì)量發(fā)生改變而不符合官方要求或其他法規(guī)規(guī)定。

藥品生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)當(dāng)證明藥品中存在的這些遷移的化合物，不會(huì)對(duì)患者構(gòu)成任何安全危害。對(duì)可提取物和浸出物進(jìn)行毒理學(xué)評(píng)估，就能解答關(guān)鍵的安全性問(wèn)題。

第一步:毒理學(xué)關(guān)注閾值Threshold of Toxicological Concern(TTC)

毒理學(xué)關(guān)注閾值最早來(lái)源于FDA¹對(duì)食品包裝材料的安全評(píng)估，ICH²，EMA³和PQRI⁴也發(fā)布了相似的指導(dǎo)原則。其基礎(chǔ)是人體對(duì)所有化合物都有一定的暴露閾值，只要暴露水平低于該閾值，人體健康不會(huì)受到明顯的危害。

TTC定義了一個(gè)安全的閾值水平，當(dāng)?shù)陀谠撻撝禃r(shí)，化合物不會(huì)產(chǎn)生明顯的致癌性或其它毒性反應(yīng)。

如果給藥周期長(zhǎng)于10年, 可以將可提取物報(bào)告中最差條件下的數(shù)據(jù)換算到病人每日攝入量, 與ICH M7中制定的TTC進(jìn)行比較，對(duì)于基因毒性化合物，為1.5 µg/人/天（對(duì)于OINDP/口腔吸入或鼻腔給藥產(chǎn)品，為0.15 µg/天）。

由于TTC的閾值設(shè)定非常低，因此用這種評(píng)估方法很有可能結(jié)果是通不過(guò)的，那么，您需要考慮進(jìn)行下一步評(píng)估。

第二步:基于單個(gè)化合物的毒理學(xué)評(píng)估

毒理學(xué)專(zhuān)家通過(guò)參考文獻(xiàn)或毒理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)，對(duì)鑒定出的化合物評(píng)估其基因毒性、致癌性、全身毒性,局部耐受性和生殖毒性數(shù)據(jù)，通過(guò)換算得到單個(gè)化合物的每日允許暴露閾值（PDE)。結(jié)合產(chǎn)品最終劑型中的濃度、給藥劑量大小、給藥時(shí)間、給藥途徑等條件，以及藥品的生產(chǎn)批量等參數(shù),計(jì)算出單個(gè)可提取物/浸出物的每日攝入量，并與PDE值相比較。

案例分享

例如位于上海張江晨暉路88號(hào)2號(hào)樓1樓的默克Provantage®上海驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室（原密理博）處理過(guò)的相關(guān)案例中。

某單抗的濃度為10 g/L，從細(xì)胞培養(yǎng)到灌裝使用一次性產(chǎn)品進(jìn)行生產(chǎn)，對(duì)該單抗進(jìn)行浸出物研究來(lái)評(píng)估對(duì)病人安全性的影響。

在 2–8℃下將半成品溶液在生物反應(yīng)器中存儲(chǔ)7天，分別在第0天和第7天對(duì)下游純化工藝中累積的浸出物進(jìn)行測(cè)定。

第7天,在半成品溶液中檢測(cè)到0.87µg/mL的浸出物。其中最多的是己醛，一種可揮發(fā)性有機(jī)醇類(lèi)。通過(guò)GC-MS（氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用）檢測(cè)，己醛的量是 110 ppb (0.11 µg/ml) 。

這個(gè)藥物的給藥方式是靜脈輸液，每次105mL，每隔14天進(jìn)行長(zhǎng)期治療。通過(guò)GC-MS測(cè)定的浸出物濃度為0.87µg/mL，乘以給藥劑量105mL，得到病人每次攝入的浸出物的量為92µg。己醛

這超過(guò)了1.5µg /人/天的毒理學(xué)關(guān)注的閾值(TTC)，若沒(méi)有進(jìn)一步的信息，在這個(gè)給藥劑量下，浸出物的量是超標(biāo)的，不可被接受。

通過(guò)一些參考文獻(xiàn)或毒理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)，毒理學(xué)專(zhuān)家計(jì)算出兩個(gè)類(lèi)似的化合物——正丁醛、戊醛的每日允許暴露閾值（PDE)為3.75mg/人/天。浸出物中己醛的濃度為0.11µg /mL,乘以給藥劑量105mL,得到己醛的攝入量為12µg /人/天，這遠(yuǎn)低于3.75

報(bào)告結(jié)果

因此，毒理學(xué)家可以得出結(jié)論，病人暴露于這些潛在的浸出物中是沒(méi)有風(fēng)險(xiǎn)的。同時(shí)，毒理學(xué)專(zhuān)家也會(huì)出具一份適合于遞交給監(jiān)管部門(mén)的正式報(bào)告。

¹US Food and Drug Administration  Guidance: Genotoxicant and CarcinogenicImpurities in Drug Substance

²International  Conference on Harmonization M7 ASSESSMENTAND  CONTROL OF DNA  REACTIVE (MUTAGENIC) IMPURITIES

INPHARMACEUTICALS  TO LIMIT POTENTIALCARCINOGENIC RISK June 23, 2014

³    European Medicine Association Guideline onthe Limits of

Genotoxic ImpuritiesJune 28, 2006

⁴   Packaging Quality on Research Institute Parenteral and Oph- thalmic DrugProduct